Кальцитонин // Calcitonin, ИФА (Biomerica, США)

(Biomerica, США)

Кальцитонин // Calcitonin, ИФА (Biomerica, США)

Назначение

ИФА тест Biomerica Кальцитонин (Biomerica Calcitonin ELISA) предназначен для количественного определения кальцитонина в сыворотке крови человека. Только для in vitro диагностики.

Введение

Кальцитонин является полипептидом, состоящим из 32 аминокислот, секретирующимся первично парафолликулярными С-клетками щитовидной железы. Его основное биологическое действие – ингибирование резорбции остеокластами костной ткани. Это свойство обусловило использование кальцитонина в диагностике заболеваний, для которых характерна повышенная резорбция, таких как болезнь Педжета, а также в ряде случаев остеопороза.

Клиническое значение

Наиболее важный клинический синдром, ассоциированный с аномальной гиперсекрецией кальцитонина — это медуллярная карцинома щитовидной железы (МТС). МТС является опухолью кальцитонин- продуцирующих С-клеток щитовидной железы. Хотя МТС редка, составляя 5 — 10% от всех раковых опухолей щитовидной железы, она часто приводит к летальному исходу. Она может возникать спорадически, а может иметь наследственный характер, передаваясь как аутосомно-доминантный признак. МТС имеет очень большое клиническое значение из-за передачи по наследству. Далее, возможна ранняя диагностика по уровню сывороточного кальцитонина и полное излечение при субклинических проявлениях заболевания на ранних стадиях. МТС часто ассоциирована с другими клиническими проявлениями и имеет благоприятный прогноз излечения при хирургическом вмешательстве. Хотя МТС является редкой опухолью, она может наследоваться как множественная эндокринная неоплазия II типа. Эти опухоли обычно продуцируют сывороточный кальцитонин в диагностически значимых повышенных концентрациях. Таким образом, иммуноанализ кальцитонина в сыворотке крови может использоваться для диагностики наличия МТС с исключительной степенью точности и специфичности. У небольшого, но возрастающего процента пациентов, однако, базальные уровни гормонов неотличимы от нормальных. У части этих пациентов наблюдаются ранние стадии С-клеточной неоплазии или гиперплазии, являющиеся наиболее операбельными. Для выявления этих пациентов на ранних стадиях заболевания необходимо использовать провокационный тест на секрецию кальцитонина для предотвращения постановки ложноотрицательных диагнозов, если только проводится определение базального уровня кальцитонина. При большинстве опухолей уровень кальцитонина повышается в ответ на введение кальция или пентагастрина (pentagastrin), или их комбинации, но при использовании каждого из реагентов могут быть все же получены неверные результаты. Следовательно, в случаях клинических проявлений для диагностических целей следует использовать оба реагента. Кроме того, измерение концентрации кальцитонина также может быть использовано для мониторинга эффективности лечения у пациентов с кальцитонин-продуцирующими опухолями. Опубликованы данные, что множественные формы иммунореактивного кальцитонина обнаруживаются как у здоровых людей, так и у пациентов с МТС. Эти различные формы кальцитонина имеют молекулярный вес, варьирующий от 3400 (мономеры) до 70 000 Да (полимеры). Неопластические заболевания других нейроэндокринных клеток также могут способствовать повышению уровня кальцитонина. Наилучшим примером может служить мелкоклеточный рак легкого. Другие опухоли, такие как карциноиды и опухоли островковых клеток поджелудочной железы, также могут вызывать повышение концентрации кальцитонина в сыворотке крови. Повышенные уровни кальцитонина также отмечены как при острых, так и при хронических заболеваниях почек, гиперкальциурии и гиперкальциемии.

Принцип метода

Тест Biomerica Кальцитонин (Biomerica Calcitonin ELISA) является твердофазным иммуноферментным анализом (ИФА) «сэндвич»-типа, и предназначен для определения концентрации биологически интактной цепи кальцитонина, состоящей из 32 аминокислот. В тесте используются два разных мышиных моноклональных антитела к кальцитонину человека, специфичные к строго определенным областям молекулы кальцитонина. Одно антитело связывается только с 11-23 аминокислотами молекулы кальцитонина, оно биотинилировано. Другое антитело связывается только с 21-32 аминокислотами молекулы кальцитонина; это антитело мечено пероксидазой хрена (HRP), обеспечивающей появление окраски в реакции с субстратом. В данном анализе калибраторы, контроли или образцы сыворотки крови пациентов одновременно инкубируют с антителами, конъюгированными с ферментом, и антителами, меченными биотином, в лунках микропланшета, покрытыми стрептавидином. Таким образом, кальцитонин образца оказывается в «сэндвиче» между двумя антителами. После инкубации лунки планшета промывают для удаления не связавшихся компонентов. Фермент, связавшийся с твердой фазой, инкубируют с субстратом, тетраметилбензидином (ТМБ). Реакцию останавливают добавлением в лунки кислотного стоп-реагента, при этом цвет раствора становится желтым. Интенсивность желтого окрашивания прямо пропорциональна концентрации кальцитонина в образце. По калибраторам строится кривая зависимости оптической плотности от концентрации кальцитонина. По этой калибровочной кривой определяют концентрацию кальцитонина в контролях и исследуемых образцах. 

Свойства продукта
  • Артикул: 7024
  • Производитель: Biomerica
  • Страна: США
  • Тип продукта: диагностикум
  • Упаковка: 96×01
  • Ед.измерения: набор
  • Вес брутто: 0.38 кг